[摘 要] 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家汉斯·克里斯蒂安·约阿希姆·革兰氏(Hans Christian Joachim Gram,1853-1938)创立。文章发表在《世界临床医学》上，是医学核心期刊投稿论文发表范文，供同行参考。

　　[关键词] 革兰染色法;悬浮法;阴道分泌物

　　细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌(G+)，后者为革兰氏阴性菌(G—)。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

　　目的：对比革兰染色法和悬浮法对阴道分泌物的检出率，提高阴道分泌物的阳性检出率。方法：对480例妇科门诊患者阴道分泌物同时采用悬浮法和革兰染色法进行检测。结果：悬浮法霉菌检出率为17.3%,滴虫检出率为6.25%;革兰染色法霉菌检出率为22.7%,滴虫检出率为8.54%,淋球菌检出率为1.04%,线索细胞检出率为12.7%。结论:建议将革兰染色法作为妇科阴道分泌物常规检查项目,特别是高度怀疑的标本,更应用革兰染色法进行检测,以提高临床诊治水平。

　　目前，阴道宫颈炎为妇女的一种常见病、多发病，直接影响妇女的日常工作和生活。国内多采用悬浮法检查阴道分泌物，漏诊率高、检出率低，且不利于建立质控[1]。本文对妇科门诊480例患者阴道分泌物用革兰染色法和悬浮法同时进行检测，现报告如下。

　　1 资料与方法

　　1.1 标本来源 2004年5月至2005年12月期间，收集本院妇科门诊患者阴道分泌物480例，年龄17岁～62岁，平均年龄30岁。

　　1.2 仪器与试剂 日本OLYMPUS光学显微镜;革兰染液由四川迈克科技有限责任公司提供。

　　1.3 方法 留取标本后30 min内保温送检，由专人用悬浮法制成1.5 cm～2.0 cm、3.5 cm～4.0 cm的涂片检查，待干后进行革兰染色(操作按说明书进行)并作好标记，显微镜下先用低倍镜粗扫有无梨形、圆形、椭圆形或不规则形疑似滴虫，换油镜仔细辨认具有整个胞体红似粒细胞核及鞭毛等特征为滴虫，同时在油镜下检查霉菌、淋球菌、线索细胞等。

　　2 结果

　　480例标本检查结果：悬浮法霉菌检出率为17.3%(83例),滴虫检出率为6.25%(30例);革兰染色法霉菌检出率为22.7%(109例)，滴虫检出率为8.54%(41例)，淋球菌检出率为1.04%(5例)，线索细胞检出率为12.7%(61例)，悬浮法和染色法对滴虫的检出率比较差异无显著性,P>0.05,但染色法检出率高于悬浮法。悬浮法和染色法对霉菌的检出率经卡方检验P<0.05,有显著意义,染色法对霉菌的检出率明显高于悬浮法。另外染色法阳性而悬浮法阴性霉菌26例，滴虫11例，悬浮法阳性而染色法阴性霉菌2例，滴虫2例，复查均为阳性，淋球菌混合滴虫感染1例。

　　3 讨论

　　霉菌、滴虫及细菌性阴道宫颈炎是妇科常见病、多发病，且患者阴道分泌物性状和临床表现常无明显区别[2]，而阴道分泌物涂片检查是妇科常规检查项目，能直接反映阴道及宫颈是否存在炎症及感染程度。阴道分泌物检测方法的改进及准确的结果判断为临床提供重要诊断依据，使临床医生作到了对症下药，避免滥用抗生素，对妇科病的防治具有良好的社会效益和经济效益[3]，同时使夫妻间的性生活因妇科疾病影响女方性欲得到改善。从本文两种检查方法所得结果来看，革兰染色法检出率高于悬浮法，霉菌的检出率差异有显著性。据张妮[4]报道，滴虫可能因寒冷季节受温度影响或标本不能即时送检使活动力减低及清洁度差难与白细胞区别，造成悬浮法识别困难;霉菌可因上皮细胞透明度差而使得悬浮法辨认受影响。另外革兰染色法检出淋球菌混合滴虫感染1例，若用悬浮法，则很可能因镜下白细胞的移动检出滴虫，而忽视白细胞内外革兰阴性双球菌的检测，又因女性淋球菌感染临床表现不特异或无症状[5]，临床医生易根据检验单结果诊断为单纯的滴虫感染，这样会给患者造成久治不愈甚至流产、早产[5]等严重后果。悬浮法阳性而染色法阴性霉菌2例，滴虫2例，复查均为阳性，这可能与初期检验人员的识别能力有关。综上所述，革兰染色法有以下优点：一份标本可多项目检查，特别是淋球菌、加德纳菌和其他条件致病菌的检测是悬浮法所不能及的;设备和技术条件要求不高，成本低，易普及;查滴虫时不受季节温度的影响;标本染色后病原体基本被杀灭，降低了环境污染;染色标本可较长时间保存以便复查及作为质量监督，另外可挑选染色好病原体典型的标本作为教学片及送各家医院临检室进行交流，提高对滴虫、霉菌、淋球菌及线索细胞等识别有困难的检验者的水平。

　　在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感);而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中的流行性脑膜炎双球菌和淋病双球菌对青霉素敏感)，而对链霉素、氯霉素等敏感。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。

　　医学核心期刊投稿发表须知：《世界临床医学》杂志是由中国国家新闻出版总署和国家科技部批准在海内外公开发行的传统医药行业发展与学术研究综合性月刊(国内统一刊号：CN11-5576国际统一刊号：ISSN1009-3389)。

　　参考文献：

　　[1] 邓光贵.用吖啶橙染色法快速检查阴道分泌物涂片[J].中华医学检验杂志，1992，15(4)：225.

　　[2] 李曼辉，宋芳，王辉.阴道分泌物快速染色法与悬滴法比较及质控[J].中国现代医药杂志，2005，7(1)：13.